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大肠杆菌培养基

更新时间:2018-10-11 15:03:08 点击次数:331次字号:T|T

ForMedium能提供各类繁多的大肠杆菌相关干粉培养基,包括:

自动诱导培养基(AIM):LB肉汤;2YT肉汤;极品肉汤(TB);超级肉汤基础(SB)。

大肠杆菌培养得率及生长优化培养基:LB培养基;胰蛋白胨;Terrific极品培养基;SB超级肉汤培养基;M9基本盐分。

λ噬菌体培养基:NZ;NZM;NZY;NZYM;NZCYM;NZYTD.

M13噬菌体及单链DNA噬菌体培养基:YT培养基;2×YT培养基。

感受态细胞培养基:SOB;SOC。

细菌培养基组分。

   大多数大肠杆菌培养基的主要成分为:胰蛋白胨、酵母粉、葡萄糖、氯化钠、琼脂、添加剂。

   自动诱导培养基(AIM)被用于培养能被IPTG诱导表达的菌株,最开始没有诱导,然后随着菌体的生长开始自动诱导目标蛋白表达,诱导通常在菌浓度高到接近饱和时发生。其原理是:在细菌生长过程中,在一定浓度之上的葡萄糖将被优先代谢以防止在葡萄糖耗尽之前的乳糖消耗,乳糖消耗通常在培养过程对数噬菌体的中后期发生。随着葡萄糖耗尽,乳糖开始被代谢并被β-半乳糖苷酶转化为诱导子异乳糖。异乳糖能引起乳糖抑制子从特定的DNA结合位点的释放,从而诱发从lavUV5启动子开始的T7 RNA聚合酶的表达,同时解锁T7lac启动子,以便目标蛋白通过T7 RNA聚合酶进行表达。

使用AIM,在菌体到高浓度后会有自发的蛋白表达诱导,不必监测细菌浓度也不需要传统的IPTG诱导。


AIM的成分从功能上可以归为五大类:

1.氮源:胰蛋白胨和酵母粉是主要的氮源。ForMedium根据这两种成分数量和比例不同配制出四种不同类型的培养:AIM-LB Broth;AIM-2-YT Broth;AIM-Terrific BrothAIM-Super Broth.另外,培养基中加入了硫酸铵以加速蛋白合成。

2.碳源:葡萄糖,乳糖等。

3.缓冲液:磷酸缓冲液。

4.硫酸镁:高菌体浓度生长通常受限于硫酸镁含量,加入充足的硫酸镁以达到饱和菌体浓度。

5.微量元素:高菌浓度和高蛋白得率通常对微量元素的需求更高。为了达到更好的效果,含有九种不同微量元素的化合物(CaCl2,MnSO4,ZnSO4,CoCl2,CuSO4,NiCl2,NaMoO4,Na2SeO3,FeCl3

)需要加入AIM培养基中。


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